引子合成服務
合成原理
Oligo primer 的人工化學合成始於 50 年代初期，1980 年全自動化的固相引子合成儀問市後，使得快速、高效率合成 Oligo primer 成為可能，大大地推動了生物工程技術的蓬勃發展。現在一般都採用 β-乙腈亞磷醯胺化學合成 Oligo primer，合成是從 3'→5' 方向進行，通常 3' 端的第一個鹼基已結合在 Glass 載體（Controlled Pore Glass，CPG）上。合成的詳細過程如圖，簡要說明如下：
- Step1(Detritylation)：脫去附加在 CPG 載體上的第一個鹼基 5'-OH 基團上的保護基（DMTr)，預備加入下一個新的鹼基。
- Step2：活化新的鹼基單體 (Phosphoramidite)，準備與第一個鹼基進行反應。
- Step3(Coupling)：第二個鹼基與第一個鹼基發生偶合反應。
- Step4(Capping)：將沒有反應的第一個鹼基的 5'-OH 加帽封死 (Capping)，使其不再進一步參與反應。
- Step5(Oxidation)：將核苷亞磷酸酯氧化成更穩定的核苷磷酸酯 (即將三價磷氧化成五價磷)。
- 重複進行 Step1～Step5 的步驟，直到合成完所需的 Oligo DNA 序列。
- 合成結束後，將 Oligo DNA 分子從 CPG 上切下，再進行下一步的純化。
